SKF38393抑制大鼠DRG分离神经元ATP-激活电流

目的 :探讨多巴胺D1受体的选择性激动剂SKF3 83 93HCl对ATP -激活电流的作用。方法 :在大鼠新鲜分离的DRG神经元标本上应用全细胞膜片钳技术 ,记录SKF3 83 93对ATP -激活电流的作用。结果 :大部分受检细胞 ( 87.5% ,77/ 88)对ATP敏感 ,10 - 6 ～ 10 - 3 mol/LATP可引起剂量依赖性呈明显去敏感的内向电流。在此77个细胞中 ,预加SKF3 83 93可引起三类反应 :①外向电流 ( 7.8% ,6/ 77) ;②内向电流 ( 2 6.0 % ,2 0 / 77) ;③无反应( 66.2 % ,51/ 77)。与ATP -激活电流相比 ,SKF3 83 93 -激活电流幅值小 ,无明显去敏感现象。预加SKF3 83 93 3 0～ 60s对ATP -激活电流的影响如下 :在 74.0 % ( 57/ 77)的细胞产生抑制作用 ,15.6% ( 12 / 77)的细胞产生增强作用 ,其余的无明显作用 ( 10 .4% ,8/ 77) ,本文主要针对此抑制作用进行探讨。此种抑制作用与SKF3 83 93本身是否引起或引起的是内向或外向电流无关。在浓度 10 - 9～ 10 - 4mol/L范围SKF3 83 93对 10 - 4mol/LATP -激活电流的抑制作用依赖于SKF3 83 93的浓度。胞内透析H 7上述抑制作用可完全被取消 ,而胞内透析H9此抑制作用依旧存在。结论 :SKF3 83 93对ATP -激活电流的抑制作用可能是由于D1受体激活后经G蛋白偶联及PKC途径使ATP受体磷酸化所致。

IL-6反义寡核苷酸对骨吸收的抑制作用

目的 :探讨IL -6反义寡核苷酸在体外对骨吸收的抑制作用及意义。方法 :分离培养新生小鼠颅盖骨 ,并分别用IL -6硫代反义寡核苷酸 (ASON )、无义寡核苷酸 (NSO )、IL -6或ASON与IL -6联合作用颅盖骨 ,未加药组为对照。培养一定时间后 ,测定培养上清液的钙含量 ,将实验组钙含量与对照组钙含量比值作骨吸收指数。结果 :ASON( 5.0m/L)分别作用 12、2 4、48h后 ,颅盖骨骨吸收指数呈时间依赖性降低。作用 48h后 ,ASON使颅盖骨骨吸收指数呈剂量依赖性降低 ;IL -6则使其呈剂量依赖性升高 ;ASON可轻度降低IL -6升高的骨吸收指数 ;ASON( 5μm /L)对有或无IL -6培养的颅盖骨骨吸收抑制率分别为 10 .8%、19.3 % ;NSO对骨吸收指数无影响。结论 :IL -6反义寡核苷酸对体外培养的颅盖骨骨吸收有一定的抑制作用

脐血清用于CIK诱导及细胞培养的观察

目的 :观察脐血清能否替代正常人AB血清用于人PBMC体外诱导CIK的细胞培养过程。方法 :①按照本室的方法体外分别用含正常人AB血清或脐血清的培养基诱导正常人 (脐血组和正常组各 10例 )CIK ,比较不同血清诱导CIK的扩增差异 ;②流式细胞仪检测CIK细胞表面标志CD3、CD56;③ 3H -TdR释放法检测CIK对肝癌细胞系SMMC -772 1、Bel-740 2、Hep -3b ,肠癌细胞系HIC -2 51,正常胎肝细胞系L -0 2 ,红白血病细胞系K562及经阿霉素诱导的耐药K562细胞毒作用。结果 :①不同血清诱导的CIK在细胞扩增曲线及细胞表面标志上无差异 ,细胞扩增倍数达 64.3倍和 67.4倍 (t =1.0 0 3 ,P >0 .0 5) ,CD3 + CD56+ 细胞扩增倍数达 80 0倍以上 ;②脐血组CIK对肝癌细胞SMMC -772 1、Bel-740 2、Hep -3b、HIC -2 51杀伤能力达 70 %～ 80 % ,与正常组相同 ,杀伤能力无差异 ;③对正常胎肝细胞系L -0 2的细胞毒作用 <5% ;④二组CIK对已诱导耐药的K 562细胞和未诱导耐药的K562细胞细胞毒作用均达到 70 %左右。结论 :脐血清组和正常人组CIK一样对肝癌细胞有很强的细胞毒作用 ,对正常肝细胞无损伤 ,并且对耐药肿瘤同样有效 ,具有临床应用前景

PAMP对ADM舒张血管作用的初步研究

目的 :观察肾上腺髓质素原来源的两个不同肽段Adrenomedullin (ADM )和 proadrenomedullinN -ter minal 2 0 peptide (PAMP)单独或联合作用对血管张力的影响。 方法 :在孵育的大鼠离体胸主动脉环上预先加入苯肾上腺素使之收缩达最大张力后 ,单独或联合加入不同浓度的ADM和PAMP ,用张力换能器和多导生理记录仪 ,记录其对离体血管环张力作用曲线。结果 :10 - 9～ 10 - 7mol·L- 1的ADM浓度依赖地抑制苯肾上腺素诱导的血管收缩 ;相同浓度的PAMP对苯肾上腺素诱导的血管收缩或基础状态下的血管张力无显著影响。不同浓度的PAMP与ADM联合应用对苯肾上腺素诱导的血管张力反而有增强作用。血管去除内皮或用L -N -硝基精氨酸预先孵育后 ,ADM的舒血管效应及PAMP对其的拮抗作用均消失。结论 :ADM可诱导血管舒张 ,PAMP可拮抗ADM的舒血管效应 ,其作用与NO信号转导途径有关

可溶性支架转反义PCNA寡核苷酸预防静脉移植物再狭窄

目的 :研究可溶性支架转反义PCNA寡核苷酸是否具有抑制静脉移植物内膜增殖的效果。方法 :2 5只健康纯种新西兰大耳白兔按体重随机分对照组 ,支架组 ,正义组 ,反义组 ,错配组 ,将颈外静脉间置于同侧颈总动脉后用可溶性支架将反义 ,正义及错配的基因片段导入静脉移植物。术后 2 8d检测各组内膜、中膜的厚度。结果 :①反义组静脉桥的内膜厚度为 42 .72± 3 .792 μm ,显著低于对照组、支架组、正义组及错配组 ( 79.0 0± 1.2 2 5μm ,75.0 4± 3 .2 42 μm ,74.77± 8.53 5μm ,78.61± 7.816μm ,P <0 .0 1)。②反义组内膜与中膜比值为 0 .68± 8.70 1,明显低于对照组、支架组、正义组及错配组 ( 1.3 2± 0 .0 66,1.3 5± 0 .198,1.3 3± 0 .2 58,1.3 9± 0 .2 0 0 ,P <0 .0 1)。结论 :反义PCNA基因可明显抑制内膜的增殖 ,有预防移植血管再狭窄的作用

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